首頁
瀏覽量: 142
- 產(chǎn)品名稱： 藻紅蛋白抗體標記試劑盒
- 產(chǎn)品貨號：
- 貨期： 0
- 價格與訂購： 2800
- 數(shù)量：
庫存： 100
- 規(guī)格： 一盒
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
產(chǎn)品介紹：
藻紅蛋白（R-phycoerythrin ,R-PE）是從紅藻中分離提純的一種熒光蛋白，最大激發(fā)波長為565nm，最大熒光發(fā)射峰為575nm。，由于其吸光度和熒光量產(chǎn)率很高，熒光強而穩(wěn)定，靈敏度高備受免疫檢測標記領(lǐng)域青睞。R-PE蛋白的亞基組成為（αβ）6γ，每個α、β亞基分子量為20KDa，每個γ亞基分子量為30KDa,總分子量為240kDa。目前還沒有辦法通過重組蛋白表達量產(chǎn)，只能從紅藻中提取，因此其生產(chǎn)成本制約其廣泛使用。
基本原理：
本試劑盒利用抗體和R-PE上游離的氨基，采用定向?qū)优悸?lián)技術(shù)將抗體分子與R-PE共價偶聯(lián)，本試劑盒采用加長臂方案，使被標記抗體與熒光蛋白之間有一定長度柔性連接臂，避免由于位阻妨礙抗體活性或者熒光蛋白發(fā)光效率。
主要特點：
ü 試劑盒組分齊全，操作簡單，只要按照操作步驟進行便可得到高品質(zhì)R-PE偶聯(lián)抗體；
ü 本試劑盒所配置的R-PE為高純度，高活性熒光蛋白，熒光發(fā)光效率更高；
ü 本試劑采用定向偶聯(lián)技術(shù)，熒光蛋白和抗體都不會發(fā)生自連，保證偶聯(lián)物的特異性和均一性；
ü 試劑盒所使用的交聯(lián)劑增加了延長臂，確保不會因為蛋白質(zhì)位阻而影響發(fā)光效率；
ü 鑒于R-PE的蛋白骨架特性，其抗淬滅能力更強。
試劑盒已經(jīng)提供材料：
ü R-PE蛋白凍干粉 1mg*1支 可用于標記300-500ug抗體
ü R-PE蛋白活化試劑 2mg*1支 使用前加ddH2O 200ul
ü 修飾反應(yīng)液 30ml*1瓶
ü 標記緩沖液 30ml*1瓶
ü 抗體修飾試劑干粉 2mg*1支 使用前加1000ul ddH2O
ü 30KMWCO超濾管 3支
ü 封閉試劑 1支 使用前加DMSO 5ul
ü DMSO溶劑 200ul*1支
ü 說明書 1份
其他需要自備試劑材料：
2 待標記的生物分子；
2 移液器及吸頭；
2 去離子水。
試劑盒儲存
試劑盒抗體修飾試劑、R-PE蛋白活化試劑和封閉試劑，放在-20?C，其余組分放在2-8℃可保存6個月以上。
試劑盒操作流程：
1a.抗體的修飾 與1b.R-PE的活化兩個步驟同時進行
1a.抗體的修飾
1）抗體修飾試劑干粉溶解于ddH2O配制成2mg/ml的抗體修飾試劑液。
2）取待標記抗體（純度>90%），用修飾反應(yīng)液調(diào)整濃度到 5mg/ml左右，按照每mg抗體加入5μl抗體修飾試劑液，輕輕混勻，在室溫下攪拌反應(yīng) 60-90分鐘。
3）反應(yīng)完成后，轉(zhuǎn)移到超濾管內(nèi)芯，并添加標記緩沖液，通過超濾管多次離心置換溶液去除多余抗體修飾試劑，超濾管內(nèi)芯收集液為修飾抗體，并調(diào)節(jié)濃度至 3mg/ml。
1b.R-PE蛋白的活化
1）取1支R-PE蛋白凍干粉用標記緩沖液重懸到5mg/ml濃度R-PE蛋白溶液；
2）將R-PE蛋白活化試劑溶解于ddH2O，配制成5mg/ml R-PE蛋白活化試劑溶液，按照每mg R-PE蛋白加入100ul的比例加入到R-PE蛋白溶液，室溫避光反應(yīng)2小時；
3）反應(yīng)完畢，轉(zhuǎn)移到超濾管內(nèi)芯，通過超濾管離心4次，每次120，00rpm 5min,置換為標記緩沖液,以去除游離的R-PE蛋白活化試劑，濾芯內(nèi)溶液即為活化R-PE蛋白。
2.活化R-PE蛋白與抗體偶聯(lián)
1）活化R-PE蛋白濃度調(diào)整為5mg/ml；
2）將修飾抗體與活化R-PE蛋白，按照質(zhì)量比1:3比例（每mg修飾抗體對應(yīng)3mg活化R-PE蛋白）混合，室溫避光反應(yīng)2小時；
3）將封閉試劑管中加入5ul DMSO配成封閉試劑液，按照每0.5mg抗體5ul的體積封閉試劑液加入步驟2）反應(yīng)產(chǎn)物中，封閉未反應(yīng)完的活性基團；
4）將步驟3)溶液加入超濾管通過反復離心置換標記緩沖液，去除封閉試劑等；
5）標記好的抗體分裝，加入適當保護劑，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
地 址：
產(chǎn)品銷售：
E - mail ：
郵 編：
Amily
