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抗體藥物研發(fā)服務(wù)--噬菌體展示技術(shù)

一、噬菌體展示技術(shù)

噬菌體展示技術(shù)
服務(wù)編號(hào)	CS601

將外源蛋白質(zhì)或多肽的基因表達(dá)產(chǎn)物與噬菌體衣殼蛋白融合，并在其表面展示，同時(shí)將其遺傳密碼信息整合到個(gè)體噬菌體的基因組中。這個(gè)技術(shù)的最大優(yōu)點(diǎn)是直接將可現(xiàn)的表達(dá)型與其基因型聯(lián)系在一起再利用其配體的特異性親和力將所感興趣的蛋白質(zhì)或多肽挑選出來(lái)。

二、篩選過(guò)程

將噬菌體展示文庫(kù)作為可溶相，而將與欲選擇的重組其因產(chǎn)物有特異性親和力的靶分子周定在一個(gè)固相載體上，洗去不能與固定相特異結(jié)合的文庫(kù)的大部分成員，將特異結(jié)合的成員洗脫下來(lái)，再進(jìn)一步擴(kuò)增，進(jìn)入下一輪淘選。

最常用的噬菌體:

溶源性的單鏈絲狀噬菌體(如M13、f1和￡d)

噬菌體展示技術(shù)與傳統(tǒng)獲得抗體技術(shù)的比較:

三、噬菌體隨機(jī)肽庫(kù)

將化學(xué)合成的消機(jī)寡核苷酸序列與噬菌休表面蛋白基因融合，在噬菌休表面表達(dá)出各種氨基酸組合的隨機(jī)序列短肽。利用噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)可以高通量篩選各種抗原的抗原表位。

四、基因工程抗體開(kāi)發(fā)

免疫庫(kù):

對(duì)于特定免疫抗原的抗體淘選的效率較高，但一般僅適用于一種特異性抗體的選擇，庫(kù)容量要求不高，一般10^6-8的庫(kù)容量就可滿(mǎn)足需要。

天然庫(kù):

不用免疫動(dòng)物。骨髓內(nèi)和骨髓外所有抗體基因都包含在內(nèi)，所構(gòu)建的抗體庫(kù)適用于所有抗原所對(duì)應(yīng)的抗體的選擇，庫(kù)容量要求較高，最小需要達(dá)到10⁹，因?yàn)槟壳肮浪愕淖匀唤绲目乖N類(lèi)在這個(gè)數(shù)量級(jí)上。

種屬來(lái)源:

兔源，鼠源，人源

庫(kù)的類(lèi)型:

scFv(由VH和VL組成，并由一個(gè)小肽(Gly₄Ser)₃連接成一個(gè)單鏈多肽)庫(kù)、Fab(含有VH-CH，VL-CL，并由二硫鍵連接在一起)庫(kù)和VHH(只有重鏈可變區(qū))庫(kù)。