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一、酵母蛋白表達(dá)服務(wù)簡(jiǎn)介
酵母表達(dá)系統(tǒng)，是工業(yè)微生物中應(yīng)用較廣泛的系統(tǒng)，遺傳和生理背景清楚而且安全，結(jié)合了原核和高等真核表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn):生長(zhǎng)快、培養(yǎng)成本低廉、操作簡(jiǎn)單并且蛋白翻譯后能進(jìn)行正確加工、修飾和折香、表達(dá)的重組蛋白更加穩(wěn)定、適于表達(dá)真核生物基因和制備有功能的蛋白質(zhì)。
二、武漢科斯坦生物優(yōu)勢(shì)
1.表達(dá)宿主包括釀酒酵母和畢赤酵母，蛋白表達(dá)成功率高o
2.可提供多種酵母表達(dá)載體:有適用于分泌表達(dá)及胞內(nèi)表達(dá)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型表達(dá)載體;有可以直接轉(zhuǎn)化野生型畢赤酵母并且高效篩選表達(dá)菌株的載體等。
3.豐富的酵母表達(dá)經(jīng)驗(yàn):可根據(jù)客戶需求選擇合適的載體，為客戶進(jìn)行整個(gè)表達(dá)體系的條件摸索及優(yōu)化。
4.高通量的酵母轉(zhuǎn)化篩選平臺(tái)，豐富的酵母蛋白表達(dá)經(jīng)驗(yàn):很多原核表達(dá)的分泌型蛋白會(huì)出現(xiàn)不溶或包涵體無(wú)活性情況，選擇酵母表達(dá)系統(tǒng)則可避免這些問題，成功表達(dá)蛋白。
5大規(guī)模生產(chǎn):可滿足每批次1-4000L的生產(chǎn)規(guī)模。
6.一站式服務(wù):基因設(shè)計(jì)及優(yōu)化、蛋白表達(dá)條件優(yōu)化、組成型表達(dá)菌株構(gòu)建、蛋白純化及后續(xù)加工處理、數(shù)據(jù)及報(bào)告整理。
三、服務(wù)內(nèi)容
| 服務(wù)名稱 | 服務(wù)內(nèi)容 | 服務(wù)周期 | |
| 表達(dá)體系選擇 | 表達(dá)載體:pPIC9k、 pPIC3.5、 pPICZQA、 pA0815、 pGAP a、pYES2/NTA 表達(dá)菌株:GS115、KM71、X33、INVSC1 |
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| 表達(dá)載體構(gòu)建 | 基因優(yōu)化及設(shè)計(jì),合成基因及亞克隆 | 2-4周 | |
| 表達(dá)及純化測(cè)試 | 質(zhì)粒線性化、轉(zhuǎn)化、抗性平板篩選、PCR鑒定或梯度加壓 篩選、表達(dá)分析鑒定SDS-PAGE and/or WB)、最優(yōu)條 件100mL擴(kuò)大及純化測(cè)試、標(biāo)簽去除測(cè)試(可選) | 3-6周 | |
| 1-10L表達(dá)及純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白buffer置換濃 縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化后蛋白、MS鑒定(可選)包 涵體變復(fù)性(可選)、標(biāo)簽去除(可選) | 2-3周 | |
| 大規(guī)模發(fā)酵與純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白Buffer置換濃 縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化后蛋白、MS鑒定(可選) | 10-20L | 3-4周 |
| 20-50L | 4-5周 | ||
| 50L以上 | 6-12周 | ||
四、服務(wù)套餐
基礎(chǔ)套餐CS-1031:
針對(duì)一個(gè)質(zhì)粒構(gòu)建，測(cè)試20個(gè)陽(yáng)性克隆，最佳克隆進(jìn)行純化測(cè)試。
增強(qiáng)套餐CS-1032:
針對(duì)一個(gè)質(zhì)粒構(gòu)建，測(cè)試20個(gè)陽(yáng)性克隆后，挑選最佳2株克隆進(jìn)行表達(dá)條件優(yōu)化，最佳克隆及最佳表達(dá)條件進(jìn)行純化測(cè)試。
加壓套餐CS-1033:
針對(duì)一個(gè)質(zhì)粒構(gòu)建，轉(zhuǎn)化后抗生素加壓篩選，挑選10株克隆進(jìn)行表達(dá)條測(cè)試，挑選最佳2株克隆進(jìn)行表達(dá)條件優(yōu)化，最佳克隆及最佳表達(dá)條件進(jìn)行純化測(cè)試。
五、表達(dá)案例
六、咨詢與訂購(gòu)
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